建立了免疫亲和柱全自动固相萃取高效液相色谱法测定粮油中的玉米赤霉烯酮的方法。样品经90%乙腈水提取离心,1∶4稀释离心或过滤,采用全自动固相萃取进行免疫亲和柱净化,洗脱液55℃氮气吹干,1 mL初始流动相复溶上机检测。结果表明:本方法测定粮油中玉米赤霉烯酮的检出限为7μg/kg,定量限为20μg/kg,相关系数>0.999,加标回收率为99.0%～110.4%,日内相对标准偏差为1.5%～2.1%(n=6),日间精密度为6.1%(n=18),测定三种基体质控物质的结果均在标示值范围内,且无显著台间差,无仪器残留。本方法同时处理6份样品的前处理时间为35 min,可批量自动化处理样品提高工作效率,避免因人员操作导致的结果偏差,可用于大量粮油样品中玉米赤霉烯酮的精准测定。