超高效液相色谱串联质谱在离子化过程中容易受到基质干扰影响定量的准确性。全碳标记的13C稳定同位素内标由于和目标化合物有相同的保留时间和离子化效率，因此能够有效的校正基质效应，达到提高准确度和精密度的目的。手动净化需要手动调节各种参数，操作繁琐，容易导致实验失败或者重复性较差。全自动固相萃取仪利用高精度注射泵和12通切换阀实现自动上样、淋洗和洗脱全过程，避免人为因素引入的误差，增加实验通量，提高方法准确度和精密度。因此本文建立了免疫亲和柱全自动净化-高效液相色谱-质谱法-全碳标记内标法精确测定粮油中的玉米赤霉烯酮的方法。结果表明:内标法测定粮油中玉米赤霉烯酮的检出限为0.33 μg/kg，定量限为1 μg/kg，相关系数为0.9995，回收率在92.7%～101.3%，RSD值在0.02%～3.74%，测定三种基体质控样品的结果均在标示值范围内，准确性和精密度明显优于外标定量方法（外标法定量方法测定粮油中玉米赤霉烯酮的检出限为1.67 μg/kg，定量限为5 μg/kg，相关系数为0.9989，回收率在54.8%～76.4%，RSD值在0.5%～7.0%）。本方法无需氮吹、可批量自动化处理样品提高工作效率，避免因人员操作导致的结果偏差，可用于大量粮油样品中玉米赤霉烯酮的精准测定。