1 范围

本标准规定了未经分离二次氧化产物的油脂直接测定2-硫代巴比妥酸值（TBA值）的方法。

本标准适用于动植物油脂、脂肪酸及其酯类、乙二醇酯类等。

2 规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 15687  动植物油脂  试样的制备

GB/T 6682—2008  分析实验室用水规格和试验方法

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1 2-硫代巴比妥酸值 2-thiobarbituric acid value

1mg试样与1mL2-硫代巴比妥酸试剂反应，在530nm波长下测得的吸光度。

2-硫代巴比妥酸值没有单位，而是以1mg试样溶于100mL溶剂和试剂反应所测得的吸光度值为1个计量单位。

4 原理

油脂的二次氧化产物与2 -硫代巴比妥酸反应形成缩合物，在530nm波长处具有最大吸收峰，测定其吸光度。

5 试剂

5.1 1-丁醇：水分含量不大于0.2%。

5.2 2-硫代巴比妥酸。

5.3 TBA试剂：称200mg 2-硫代巴比妥酸置于100mL容量瓶中，并用1-丁醇稀释至刻度。在室温下放置12h～15h，以溶解2-硫代巴比妥酸。然后用滤纸过滤，除去不溶性残渣。滤液用1-丁醇定容到100mL，并在0℃～4℃冰箱中储藏备用。TBA试剂保存和使用时间不超过1周。

5.4 所有试剂均为分析纯，实验用水应符合 GB/T 6682—2008 中三级水的要求。

6 仪器设备

6.1 容量瓶：25mL、100mL。

6.2 移液管：5mL。

6.3 具塞试管：20mL。

6.4 水浴锅：温度可控制在95℃±0.5℃。

6.5 分光光度计：适合在530nm波长范围使用，带有10mm比色皿。使用双光束分光光度计时，建议使用一对匹配的10mm比色皿。

7 扦样

推荐采用GB/T 5524 规定的方法扦样。

实验室收到的样品必须有真实代表性，并在运输和贮存期间不得有变化。

8 试样的制备

按 GB/T 15687 制备试样。

固体样品在不高于其熔点10℃的条件下熔化。熔化后若试样不够澄清，可进行过滤。黄油在40℃条件下熔化，并用亲水过滤器过滤除去水分。

9 操作步骤

9.1 称取液体或已制备好的试样50mg～200mg，精确到0.1mg，直接装入25mL容量瓶中。用5mL～10mL的1-丁醇溶解并稀释至刻度。

注：如果试样的吸光度不在0.2～0.8范围内，可重新调整称取试样的量。

9.2 用移液管（6.2）吸取5mL样品液（9.1）加入具塞试管（6.3）中，用另1支移液管（6.2）吸取5mLTBA试剂（5.3）加入该具塞试管中，盖上塞子并充分摇动。

将具塞试管置于95℃水浴锅（6.4）中加热2h。然后将具塞试管从水浴锅中取出并用自来水冷却至室温（大约10min）。

注：高海拔地区如西宁、拉萨等，可使用沙浴或油浴以保证加热温度至95℃。

9.3 将具塞试管中的溶液转移到干净、干燥的10mm比色皿中，用蒸馏水在530nm处校正分光光度计（6.5）零点，测定溶液的吸光度（A）。

9.4 用移液管（6.2）吸取5mL1-丁醇（5.1）于具塞试管中，用另1支移液管（6.2）吸取5mLTBA试剂（5.3）加入具塞试管中，盖上塞子并充分摇动。将试管置于95℃水浴锅（6.4）中加热2h。将试管从水浴里取出并用自来水冷却至室温，大约10min。立即按9.3测定空白试剂吸光度（B）。

注： 空白试剂吸光度应不超过0.1。否则应制备新的符合纯度要求的TBA试剂。由于1-丁醇不纯可导致空白试剂吸光度超过0.1。将0.1%TBA溶剂蒸馏2h可除去其中所含杂质。1-丁醇中的水分可以通过蒸馏去除，弃掉初始溶液，收集乳白色溶液。

10 结果表示

10.1 2-硫代巴比妥酸值（TBA）按式（1）计算：

式中：

A——被测溶液的吸光度（9.3）；

B——空白试剂的吸光度（9.4）；

m——样品的质量，单位为毫克（mg）；

50 ——试样用1-丁醇稀释至25mL，并用10mm比色皿测定吸光度的有效因子。

计算结果保留3位小数。

10.2 当空白试剂吸光度低于0.05时，被测溶液的吸光度可通过蒸馏水校正后直接测得。

此时，按式（2）计算2-硫代巴比妥酸值（TBA）：

式中：

A——被测溶液的吸光度（9.3）；

m——样品的质量，单位为毫克（mg）；

50 ——试样用1-丁醇稀释至25mL，并用10mm比色皿测定吸光度的有效因子。

计算结果保留3位小数。

11 精密度

11.1 实验室间的检验

附录A汇总了本方法精密度的实验室间测试情况。由这些实验室间试验得到的数据可能不适用于其它范围和测试对象。

11.2 重复性

在同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，在短时间内获得的两个独立测试结果的变异系数大于表A.1中所给的重复性限值（r）的情况应不超过5%。

11.3 再现性

在不同的实验室，由不同的操作者使用不同的设备，按相同的测试方法，获得的两个独立测试结果的变异系数大于表A.1中所给的再现性限值（R）的情况应不超过5%。

12 试验报告

试验报告应说明：

——所使用的方法，并且是遵循本标准进行的；

——测试结果。如果进行了重复性检验，提供最后结果；

——本标准中未指定或自选操作，以及可能影响了结果的任何细节；

——完成试样鉴定所需要的所有信息。

附录A

（资料性附录）

实验室间测试结果

实验室间测试已经完成，参加试验室20个。对精炼低芥酸菜籽油、部分氢化精炼低芥酸菜籽油、精炼菜籽油盲样、室温储藏2年大豆油和室温储藏14天奶油样品进行测试，给出的统计结果（根据ISO 5725[5]评价）见表A.1。